化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測方法驗證技術(shù)規范

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各省、自治區、直轄市食物藥品監視治理局（藥品監視治理局）：

　　為規范化妝品檢測方法的驗證程序，《化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測方法驗證技術(shù)規范》已經(jīng)國家食物藥品監視治理局化妝品尺度專(zhuān)家委員會(huì )審議通過(guò)，現予印發(fā)。
　　國家食物藥品監視治理局電泳儀槽

　　二O一O年十一月二十九日
附錄：《化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測方法驗證技術(shù)規范》

　　化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測方法驗證技術(shù)規范
　　為加強對化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測方法研究工作的技術(shù)指導，規范化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測方法研究和驗證工作，明確檢測方法驗證內容和評價(jià)尺度，有效保證研究制定的檢測方法具備提高前輩性和可行性，特制定本規范。

　　1 合用范圍部分收集器

　　本規范劃定了化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測方法研究和建立過(guò)程中檢測方法驗證內容、技術(shù)要乞降評價(jià)指標。

　　本規范合用于化妝品中禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)檢測方法的驗證與評價(jià)。

　　2 依據

　　《化妝品衛生規范》

　　3 釋義

　　3.1 本規范中所指化妝品中禁用物質(zhì)是指《化妝品衛生規范》中劃定的化妝品禁用組分。

　　3.2 本規范中所指化妝品中限用物質(zhì)是指《化妝品衛生規范》中劃定的化妝品組分中限用物質(zhì)、限用防曬劑、限用防腐劑、限用著(zhù)色劑、暫時(shí)答應使用的染發(fā)劑等。

　　4 定義與術(shù)語(yǔ)

　　4.1 被測物質(zhì)

　　是指本規范第3項劃定的禁用物質(zhì)和限用物質(zhì)。

　　4.2特異性

　　在確定的分析前提下，檢測方法所具備的檢測和區分共存組分中被測物能力的特性。

　　4.3 線(xiàn)性及線(xiàn)性范圍

　　4.3.1 線(xiàn)性

　　是指在設計范圍內檢測響應值與樣品中被測物質(zhì)濃度或量成比例關(guān)系的程度。

　　4.3.2 線(xiàn)性范圍

　　是指利用一種方法取得精密度、正確度均符合要求的檢測結果，而且呈線(xiàn)性的被測物質(zhì)濃度或量的變化范圍。

　　4.4檢出限和定量下限

　　4.4.1 檢出限：被測物質(zhì)能被檢測出的最低量。

　　4.4.2 定量下限：能夠對被測物質(zhì)正確定量的最低濃度或質(zhì)量。

　　4.5 檢出濃度和最低定量濃度

　　4.5.1檢出濃度：按照檢測方法操縱，方法檢出限對應的被測物質(zhì)濃度。

　　4.5.2最低定量濃度：按照檢測方法操縱，定量下限對應的被測物質(zhì)濃度。

　　4.6 精密度

　　在確定的分析前提下，相同濃度被測物質(zhì)的一系列獨立丈量結果的一致程度，包括日內精密度和日間精密度。

　　日內精密度：統一天測定的精密度。

　　日間精密度：不同天測定的精密度。

　　4.7回收率

　　提取回收率：是指在確定的分析前提下，回收到物質(zhì)的實(shí)際濃度的百分比，以樣品提取和處理過(guò)程前后被測物質(zhì)含量百分比表示。

　　方法回收率：是指在確定的分析前提下，被測物質(zhì)測得值與真實(shí)值的接近程度，以百分比表示。

　　4.8 實(shí)驗樣品

　　為建立和驗證檢測方法而使用的化妝品。

　　4.9 空缺樣品

　　能夠以可重復方式獲得或制備的，不含被測物質(zhì)的化妝品。

　　4.10 不亂性

　　在確定的分析前提下，一定時(shí)間內被測物質(zhì)在一定溶劑或空缺樣品中的化學(xué)不亂性，包括日內不亂性和日間不亂性。

　　日內不亂性：在一定溶劑或空缺樣品中的被測物質(zhì)在正常實(shí)驗前提或相宜樣品保留的前提下放置一天的不亂性。

　　日間不亂性：在一定溶劑或空缺樣品中的被測物質(zhì)在正常實(shí)驗前提或相宜樣品保留的前提下放置多天的不亂性。

　　5 檢測方法驗證的內容

　　方法驗證包括實(shí)驗室內驗證和實(shí)驗室間驗證。

　　實(shí)驗室內驗證的內容一般包括：方法特異性、線(xiàn)性及線(xiàn)性范圍、檢出限和定量下限、檢出濃度和最低定量濃度、精密度、正確度、回收率和實(shí)驗樣品檢測。

　　實(shí)驗室間驗證的內容一般包括：方法特異性、線(xiàn)性及線(xiàn)性范圍、檢出限、最低定量濃度、日內精密度、回收率和實(shí)驗樣品檢測。

　　6 檢測方法驗證的技術(shù)要求

　　6.1 實(shí)驗室內方法驗證

　　6.1.1特異性

　　所采用的檢測方法需要克服任何可預見(jiàn)的干擾，特別是來(lái)自實(shí)驗樣品中除被測物質(zhì)以外的其他組分的干擾，一般對具有代表性的空缺樣品和空缺樣品加被測物質(zhì)的樣品，按照確定的樣品前處理方法處理后，進(jìn)樣檢測分析，考察實(shí)驗樣品中除被測物質(zhì)以外的其他組分對被測物質(zhì)的測定有無(wú)干擾。

　　6.1.2 線(xiàn)性及線(xiàn)性范圍

　　線(xiàn)性考察：制備至少5個(gè)系列濃度（不包括零點(diǎn)）的被測物質(zhì)尺度品溶液，進(jìn)行檢測分析，記實(shí)相應的信號響應值，以被測物質(zhì)尺度品溶液的濃度為橫坐標（x）、信號響應值為縱坐標（y）建立尺度曲線(xiàn)，進(jìn)行相關(guān)性分析，并回歸得到線(xiàn)性方程和相關(guān)系數（r）。呈線(xiàn)性的被測物質(zhì)的濃度或量的變化范圍確定為線(xiàn)性范圍。

　　方法線(xiàn)性考察：在空缺樣品中加入被測物質(zhì)尺度品，制備成至少5個(gè)系列濃度（不包括零點(diǎn)）的樣品溶液，進(jìn)行檢測分析，記實(shí)相應的信號響應值，以被測物質(zhì)的濃度為橫坐標（x）、信號響應值為縱坐標（y）建立方法尺度曲線(xiàn)，進(jìn)行相關(guān)性分析，并回歸得到線(xiàn)性方程和相關(guān)系數（r）。呈線(xiàn)性的被測物質(zhì)濃度的變化范圍確定為線(xiàn)性范圍。

　　必要時(shí)，信號響應值可進(jìn)行數學(xué)轉換，再進(jìn)行回歸計算。

　　6.1.3 檢出限和定量下限

　　檢出限和定量下限考察見(jiàn)《化妝品衛生規范》。

　　6.1.4 檢出濃度和最低定量濃度

　　按照檢測方法操縱，能夠從實(shí)驗樣品背景中區分出被測物質(zhì)響應信號的最低濃度為檢出濃度，能夠對實(shí)驗樣品背景中被測物質(zhì)進(jìn)行正確定量的最低濃度或質(zhì)量為最低定量濃度。

　　6.1.5 精密度

　　6.1.5.1日內精密度

　　通常至少采用高低兩種相宜濃度的被測物質(zhì)或在空缺樣品中加入被測物質(zhì)的尺度溶液，其中：高濃度的尺度溶液應接近尺度曲線(xiàn)或方法尺度曲線(xiàn)的最高點(diǎn)（下同）;低濃度的尺度溶液應接近最低定量濃度（下同），于統一日內測定至少6次，記實(shí)被測物質(zhì)的信號響應值，考察該組丈量值的彼此符合程度，以相對尺度偏差（RSD）表示。

　　6.1.5.2日間精密度

　　通常至少采用高低兩種相宜濃度的被測物質(zhì)或在空缺樣品中加入被測物質(zhì)的尺度溶液，于不同日測定，記實(shí)被測物質(zhì)的信號響應值，考察該組丈量值的彼此符合程度，以相對尺度偏差（RSD）表示。

　　6.1.5.3相對尺度偏差（RSD）的計算， 其中：

　　6.1.6 回收率

　　6.1.6.1提取回收率

　　采用在空缺樣品或實(shí)驗樣品中添加高低兩種濃度被測物質(zhì)尺度品的方法測定，記實(shí)被測物質(zhì)的信號響應值，代入尺度曲線(xiàn)計算被測物質(zhì)的濃度，計算提取回收率。

　　6.1.6.2方法回收率

　　采用在空缺樣品或實(shí)驗樣品中添加高低兩種濃度被測物質(zhì)尺度品的方法測定，記實(shí)被測物質(zhì)的信號響應值，代入方法尺度曲線(xiàn)計算被測物質(zhì)的濃度，計算方法回收率。

　　6.1.6.3回收率的計算公式

　　回收率= （樣品中被測物質(zhì)的測定量-樣品中被測物質(zhì)的原有量）/實(shí)際添加量×100%

　　6.1.7 不亂性

　　6.1.7.1日內不亂性

　　通常至少采用高低兩種相宜濃度的被測物質(zhì)或在空缺樣品中加入被測物質(zhì)的尺度溶液，在正常實(shí)驗前提或相宜樣品保留的前提下，在不同時(shí)間點(diǎn)分別測定，代入尺度曲線(xiàn)或方法尺度曲線(xiàn)計算被測物質(zhì)的濃度，并計算其正確度和RSD值，考察被測物質(zhì)在溶液或空缺樣品中放置一天內的不亂性。

　　6.1.7.2日間不亂性

　　通常至少采用高低兩種相宜濃度的被測物質(zhì)或在空缺樣品中加入被測物質(zhì)的尺度溶液，在正常實(shí)驗前提或相宜樣品保留的前提下，連續多天測定，代入尺度曲線(xiàn)或方法尺度曲線(xiàn)計算被測物質(zhì)的濃度，并計算其正確度和RSD值，考察被測物質(zhì)在溶液或空缺樣品中放置多天的不亂性。

　　6.1.8 實(shí)驗樣品檢測分析

　　選擇具有代表性的實(shí)驗樣品，按照《化妝品衛生規范》劃定取樣，嚴格按照檢測方法進(jìn)行檢測分析。

　　6.1.9 禁用物質(zhì)陽(yáng)性結果判斷依據考察

　　化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結果必需采用相宜的、可靠的方法進(jìn)行確證。采用色譜-質(zhì)譜技術(shù)確證化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結果時(shí)，按照確定的分析前提，考察實(shí)驗樣品與加入被測禁用物質(zhì)的空缺樣品的質(zhì)量色譜峰留存時(shí)間以及濃度相稱(chēng)時(shí)的定性離子的相對豐度比的一致性。采用其他技術(shù)確證化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結果時(shí)，應建立能夠保證確證結果準確性的依據和評價(jià)指標。

　　6.2 實(shí)驗室間方法驗證超聲波清洗器

　　6.2.1 參加檢測方法驗證的機構或實(shí)驗室

　　參加檢測方法驗證的機構或實(shí)驗室必需是按照國家有關(guān)認證認可的劃定，取得資質(zhì)認定，其檢測職員、環(huán)境前提、舉措措施設備等應知足檢測方法驗證的要求。每種檢測方法參加方法驗證的檢測機構或實(shí)驗室應不少于3家。

　　6.2.2 方法驗證樣品的提供

　　方法建立機構或實(shí)驗室應向介入方法驗證的機構或實(shí)驗室提供一致的實(shí)驗樣品、空缺樣品和尺度品，并應留意樣品的被測物質(zhì)的本底情況。

　　6.2.3 方法驗證技術(shù)要求

　　實(shí)驗室間的詳細驗證技術(shù)要求同6.1實(shí)驗室內方法驗證。

　　6.3方法驗證內容的評價(jià)指標

　　6.3.1特異性

　　實(shí)驗樣品中共存物質(zhì)應對被測物質(zhì)的測定結果無(wú)干擾。

　　6.3.2 線(xiàn)性及線(xiàn)性范圍

　　線(xiàn)性范圍相宜，能夠知足化妝品中被測物質(zhì)測定要求，且線(xiàn)性良好，線(xiàn)性相關(guān)系數≥0.99。

　　6.3.3 檢出限和定量下限

　　具有足夠低的檢出限和定量下限，能夠知足化妝品中被測物質(zhì)測定要求。

　　6.3.4 檢出濃度和最低定量濃度

　　具有足夠低的檢出濃度和最低定量濃度，能夠知足化妝品中被測物質(zhì)測定要求。通常要求方法最低定量濃度的精密度的相對尺度偏差（RSD）應不超過(guò)20%，方法回收率要求在80%-120%之間。

　　6.3.5 精密度

　　根據化妝品中被測物質(zhì)的含量及確定的分析方法，精密度應能夠知足化妝品中被測物質(zhì)的測定要求，通常日內和日間精密度的相對尺度偏差（RSD）應不超過(guò)表1所列水平。特殊情況應予以說(shuō)明。

　　6.3.6 回收率

　　根據化妝品中被測物質(zhì)的含量及確定的分析方法，回收率應能夠知足化妝品中被測物質(zhì)的測定要求。通常提取回收率要求在85%-115%之間，假如提取回收率超出85%-115%的范圍，則要求方法回收率在85%-115%之間。特殊情況應予以說(shuō)明。

　　6.3.7 不亂性

　　要求被測物質(zhì)的尺度溶液或前處理后的樣品在不亂時(shí)間內使用和測定。

　　6.3.8 實(shí)驗樣品分析結果

　　在重復前提下兩次獨立測定結果的尺度偏差在已確定分析方法的精密度接受范圍內。

　　6.3.9 禁用物質(zhì)陽(yáng)性結果判斷依據

　　采用色譜-質(zhì)譜技術(shù)確證化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結果時(shí)，實(shí)驗樣品與加入被測禁用物質(zhì)的空缺樣品的質(zhì)量色譜峰留存時(shí)間要求一致，至少兩組濃度相稱(chēng)時(shí)的定性離子的相對豐度比一致，定性離子的相對豐度比的最大偏差應不超過(guò)表2的劃定。采用其他技術(shù)確證化妝品中禁用物質(zhì)陽(yáng)性結果時(shí)，要求知足陽(yáng)性結果確證依據和評價(jià)指標。

　　6.3.10 實(shí)驗室間驗證結果的評價(jià)

　　實(shí)驗室間驗證結果應相符。