不同類(lèi)型的熒光顯微鏡特點(diǎn)簡(jiǎn)述

　　對于透射式,在UV,U激發(fā)時(shí)一般用優(yōu)良的消色差物鏡即可,在可見(jiàn)光B與G激發(fā)時(shí),用半復消色差或復消色物鏡最為合適,用齊明物鏡也可以,雖然齊明物鏡象場(chǎng)不平,然而高倍物鏡用于對邊緣分辨力要求不高的試樣。一般中等以下倍率,干物鏡適用于暗場(chǎng)照明。高倍率的浸液物鏡不適合暗場(chǎng)照明,因為暗場(chǎng)聚光鏡照明錐光束會(huì )進(jìn)入物鏡。浸液式物鏡比干鏡頭更適宜作落射照明,因為空氣—玻璃界面反射光遠比玻璃—浸液界面反射光多。熒光顯微鏡

       (2)激發(fā)光不必透過(guò)載玻片,因而減少損失,而且激發(fā)光與熒光對物鏡而言方向相反,分得很開(kāi)不可能產(chǎn)生互相干擾,就是有部分反射激發(fā)光進(jìn)入物鏡后也被二向色分光鏡反射至光源,僅有極小部分透過(guò),使截止濾色片負擔小,可制成較薄的片;

　　(1)物鏡兼作聚光鏡,就沒(méi)有聚光鏡的定中與調焦問(wèn)題,而且物鏡的數值孔徑隨倍率而增大,熒光圖像亮度也隨之提高;
　　　
　　(4)落射熒光的物鏡因要通過(guò)紫外區光譜,因此必須要考慮紫外段的透過(guò)率,為此專(zhuān)門(mén)研制UV2F透紫外區熒光物鏡系列,而透射式則不必。
　　
　　
　　(3)用透射式激發(fā)時(shí),大部分熒光產(chǎn)生于切片底部,必須透過(guò)切片射出,而且還會(huì )產(chǎn)生散射。而落射照明和觀(guān)察面在同一表面,熒光圖象亮度毫無(wú)損耗,而且對象質(zhì)也無(wú)影響,特別對厚的切片,如菌落和組織培養等更具有獨特的功能;偏光顯微鏡

　　對于目鏡沒(méi)有特殊要求。
　　
　　由兩種基本形式組合,具有更大機動(dòng)性,適應各種研究需要。
　　
　　熒光檢測自1908年第一臺熒光顯微鏡問(wèn)世以來(lái),不斷地得到改進(jìn)和完善。高壓汞燈的出現;多層鍍膜技術(shù)滿(mǎn)足了激發(fā)和截止濾色片的要求;高性能優(yōu)質(zhì)光學(xué)系統的熒光顯微鏡出現,也促使了80年代免疫熒光的發(fā)展。90年代問(wèn)世的激光掃描共焦顯微鏡能進(jìn)行熒光圖像分析,測定細胞內的熒光分布和組織切片的熒光分布測定;還可實(shí)時(shí)獲得相襯—熒光重疊圖像和雙重熒光標記的原色圖像,它是在熒光顯微鏡基礎上發(fā)展起來(lái)的光、機、電、算一體化的新一代產(chǎn)品?？缛胄率兰o后,熒光檢測和熒光顯微鏡將會(huì )得到更迅猛的發(fā)展。

　  圖中透射(明場(chǎng)或暗場(chǎng))用來(lái)搜索定位,也可以用來(lái)比較熒光部位和不發(fā)熒光部位的細微結構;(d)和(e)也有相同的功能。(d)中使用相襯時(shí),要用相襯物鏡,交替進(jìn)行熒光觀(guān)察和相襯觀(guān)察,進(jìn)行比較;(e)中偏光觀(guān)察適用于雙折射物質(zhì),(c)中落射熒光和透射熒光的組合適用于雙重染色,如同時(shí)進(jìn)行FITC和TRITC雙重染色,則可用落射觀(guān)察TRITC,用透射觀(guān)察FITC標識過(guò)的部位。
　

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